Среда Плоскирева, или Агар Сальмонелла Шигелла, или Агар Плоскирева-ГРМ Оболенск. Среда Плоскирева предназначена для выделения шигелл и сальмонелл и их дифферен- циации от лактозоферментирующих энтеробактерий, сухая. Среда Плоскирева (Агар Сальмонелла Шигелла)–селективная и дифференциальная среда, широко применяемая в санитарной бактериологии для выделения Salmonella spp.и Shigella spp.из фекалий, мочи, а также свежих и консервированных пищевых продуктов.
Цена за упаковку 0,25 кг
ИНСТРУКЦИЯ
по применению питательной среды для выделения шигелл и сальмонелл сухой
(Агар Плоскирева-ГРМ Оболенск)
- НАЗНАЧЕНИЕ
Агар Плоскирева-ГРМ Оболенск предназначен для выделения шигелл и сальмонелл.
- характеристика
Агар Плоскирева-ГРМ представляет собой мелкодисперсный, гигроскопичный, светочувствительный порошок светло-желтого цвета.
Форма выпуска – в полиэтиленовых банках по 250 г.
2.1. Принцип действия
Ингибирующие вещества (желчные соли, бриллиантовый зеленый, йод), входящие в состав среды, полностью подавляют рост грамположительной микрофлоры и в 2-3 раза рост кишечной палочки, не препятствуя росту шигелл и сальмонелл.
Дифференцирующие свойства среды основаны на изменении рН в кислую сторону при росте лактозоферментирующих бактерий, которые образуют на агаре Плоскирева-ГРМ колонии малинового цвета (индикатор нейтральный красный).
2.2. Состав
Агар Плоскирева-ГРМ представляет собой смесь сухих компонентов из расчета, г/л:
| Панкреатический гидролизат рыбной муки сухой с тиосульфатом и цитратом натрия .………………………………………………….….. |
34,5 |
| a-Д-лактоза …………………………….………………………………. | 10,0 |
| Экстракт пекарных дрожжей ……………………………………………….. | 5,0 |
| Желчь крупного рогатого скота очищенная сухая …………………. | 7,0±1,5 |
| Натрий фосфорнокислый двузамещенный …………………………. | 2,0 |
| Натрий хлористый …………………………………………………… | 1,0 |
| Нейтральный красный . ………………………………………………. | 0,04 |
| Бриллиантовый зеленый ………………………………………….…… | 0,00033 |
| Йод кристаллический ………………….……………………………… | 0,04 |
| Агар микробиологический . ……………………………………..…… | 9,0±3,0 |
- АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Агар Плоскирева-ГРМ обеспечивает рост и четкую дифференциацию шигелл и сальмонелл от эшерихий через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С.
Агар Плоскирева-ГРМ полностью подавляет рост стафилококка и в 2-3 раза рост кишечной палочки.
- МЕРЫ безопасности
При анализе исследуемого материала – соблюдение СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV группы патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней».
- ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
- Термостат обеспечивающий температуру 37±1 °С
- Весы лабораторные 2 класса точности
- Автоклав
- Пробирки стеклянные
- Пипетки стеклянные позволяющие отбирать объемы жидкости 1 и 2 мл
- Цилиндр стеклянный мерный вместимостью 1000 мл
- Чашки Петри стерильные
- Вода дистиллированная
- Колбы
- Воронки стеклянные
- АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Объекты исследований санитарной и клинической микробиологии.
- Проведение анализа
7.1. Приготовление питательной среды.
Порошок в количестве, указанном на этикетке для приготовления конкретной серии питательной среды, тщательно размешивают в 1 л воды дистиллированной, кипятят в течение 3 мин, периодически перемешивая, до полного расплавления агара. Охлаждают до температуры 40-45 °С, разливают в чашки Петри слоем 5-6 мм и оставляют для застывания. Перед посевом чашки со средой подсушивают на рабочем столе с открытыми крышками в течение 90-100 мин при температуре 18-25 °С. Готовая среда в чашках прозрачная коричневато-красного цвета.
Готовую среду, разлитую в чашки Петри, можно использовать в течение 2-х суток после её приготовления при условии хранения в темном месте при температуре 18-25 °С.
7.2. Взятие, посев инфицированного материала и учет результатов производят в соответствии с “Методическими указаниями по микробиологической диагностике заболеваний, вызванных энтеробактериями” (М., 1984 г) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 г.,
№ 535 “Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений”.
7.3. Исследуемый материал для прямого посева или со среды накопления тонким слоем распределяют шпателем по поверхности чашек Петри с агаром Плоскирева-ГРМ (при необходимости сделать разведения). Инкубируют при температуре (37±1) °С в течение 18-20 ч.
- РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Учет результатов проводят визуально через 18-20 ч инкубации, отмечая наличие дифференциации лактозоотрицательных шигелл и сальмонелл от лактозоположительных штаммов эшерихий.
Колонии шигелл и сальмонелл – бесцветные или слегка розового цвета, нежные, гладкие, круглые диаметром 1,0-2,0 мм.
Колонии эшерихий малинового цвета, круглые, выпуклые, гладкие диаметром
1,5-2,5 мм.
Для получения достоверных результатов посевы образцов производить не менее, чем в трех повторностях.
- СРОК ГОДНОСТИ
Срок годности – 3 года. Среда с истекшим сроком годности использованию не подлежит.
- УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ и ХРАНЕНИЯ
Агар Плоскирева-ГРМ транспортируют при температуре от 2 до 25 С.
Хранят в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре от 2 до 25 С.
Рекламации на качество питательной среды направляют в адрес ФГУН ГИСК
им. Л.А. Тарасевича Роспотребнадзора (121002, г. Москва, Сивцев-Вражек, д.41,
тел. 241-39-22) и в адрес предприятия-изготовителя (142279 Оболенск, Московская обл., Серпуховский р-н, ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии», тел. (4967) 36-00-20, факс 36-01-16).
