АСО латекс-тест

АСО латекс-тест

АСО латекс-тест № 1 250 определений(11,02)

ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов “АСО ЛАТЕКС-ТЕСТ”

 

Набор реагентов для определения

антистрептолизина-О в реакции агглютинации латекса

 

Регистрационное удостоверение №ФСР 2007/00069 от “02”апреля 2007 г.

 

  1. НАЗНАЧЕНИЕ

Для качественного и количественного определения антистрептолизина-О (АСО) в сыворотке крови человека. Может применяться при диагностике и контроле терапии ревматической лихорадки, острого ревматоидного артрита, гломерулонефрита и других заболеваний, вызванных ß-гемолитическими стрептококками группы А, С и G.

  1. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА

2.1. Принцип действия

Иммунологическое взаимодействие АСО со стрептолизином-О, находящимся на поверхности латексных частиц. Результатом взаимодействия является агглютинация латекса с образованием мелких или крупных зерен, различимых визуально.

2.2. Состав набора

АСО-латексный реагент – суспензия частиц полистирольного латекса с нанесенным на них стрептолизином-О; суспензия белого цвета, при хранении разделяется на осадок белого цвета, легко разбивающийся при встряхивании, и бесцветную прозрачную или слегка опалесцирующую надосадочную жидкость.

Чувствительность АСО-латексного реагента откалибрована относительно международного стандарта (ВОЗ).

Физиологический раствор (ФР) – 0,9 % раствор натрия хлорида; содержит консервант – азид натрия в конечной концентрации 0,1 %; прозрачная бесцветная жидкость

Положительная контрольная сыворотка (К+) – жидкая сыворотка крови человека, инактивированная прогреванием при 56° С в течении 1 ч, содержащая АСО в концентрации более 200 МЕ/мл, дающая отрицательную реакцию на HBsAg и не содержащая антител к ВИЧ-1, ВИЧ-2 и ВГС; содержит консервант – азид натрия в конечной концентрации 0,1 %; прозрачная бесцветная или от желтоватого до красно-коричневого цвета жидкость.

Отрицательная контрольная сыворотка (К) – жидкая сыворотка крови человека, инактивированная прогреванием при 56° С в течении 1 ч, содержащая АСО в концентрации менее 150 МЕ/мл, дающая отрицательную реакцию на HBsAg и не содержащая антител к ВИЧ-1, ВИЧ-2 и ВГС, содержит консервант – азид натрия в конечной концентрации 0,1 %; прозрачная бесцветная или желтоватого цвета жидкость.

  1. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

НАБОРА

Набор рассчитан на проведение 250 определений, включая контрольные образцы.

  1. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Меры предосторожности – соблюдение “Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР” (Москва, 1981 г.).

  1. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ

– Шейкер орбитальный (любой марки с амплитудой колебаний 10-20 мм).

– Градуированные пипетки 2 класса точности или дозаторы пипеточные.

– Микропипетки автоматические или пипетки-мешалки (на 20 мкл).

– Палочки стеклянные или пластиковые.

– Часы или таймер.

  1. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Используется свежеполученная сыворотка крови. Использование в качестве образцов плазмы крови не допускается. Забор крови должен быть произведен согласно стандартной процедуре. Допускается хранение образцов 7 дней при 2-8 ˚С или 3 месяца  при температуре минус 20 ˚С. Не подвергать образцы повторному замораживанию и оттаиванию.

Исследуемая сыворотка должна быть прозрачной и не содержать взвешенных частиц.

Образцы, содержащие осадок, перед анализом должны быть отцентрифугированы в течении 10-15 мин при 2,5-3,0 тыс. об/мин

Не использовать гемолизированные или загрязненные образцы.

  1. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

7.1. Подготовка исследуемых образцов

Перед применением все компоненты набора выдержать не менее 15 минут при комнатной температуре.

7.2. Проведение анализа

Качественное определение

Нанести на карточку для постановки реакций (первую ячейку карточки) 20 мкл К+, рядом, с интервалом 2-3 см  (на соседнюю ячейку) – 20 мкл К. На оставшиеся ячейки нанести по 20 мкл исследуемых образцов.

Легким встряхиванием флакона перемешать АСО-латексный реагент и внести по 20 мкл  его в каждую ячейку с образцом. Плоским концом пипетки-мешалки (стеклянной палочкой) тщательно перемешать каждую каплю (распределить реакционную смесь по всей площади ячейки). Для каждой капли использовать новую пипетку-мешалку (стеклянную палочку).

Покачивать карточку в течение 2 минут, после чего сразу произвести учет результатов реакции.

Определение титра

В пробирках или лунках планшета  развести исследуемую сыворотку физиологическим раствором 9 г/л в соотношениях (1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, 1:7 и 1:8), для чего к 10 мкл сыворотки добавить 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70 и 80 мкл физиологического раствора, соответственно. При необходимости число разведений можно увеличить.

Нанести по 20 мкл каждого разведения в соответствующие ячейки карточки.

Легким встряхиванием флакона перемешать АСО-латексный реагент и добавить по 20 мкл в каждую ячейку с разведением, после чего перемешать каждую каплю, как указано выше для качественного определения.

Покачивать карточку в течение 2 минут, после чего произвести учет результатов реакции.

При более позднем учете могут быть получены искаженные результаты за счет неспецифической агглютинации частиц.

  1. РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ

Учет результатов проводить визуально.

Положительной РАЛ считается любое проявление агглютинации латекса (любая степень зернистости или различимых частиц в прозрачной или мутной жидкости в ячейке).

Отрицательной РАЛ считается отсутствие признаков агглютинации латекса (жидкость в ячейке остается мутной и однородной). Результаты РАЛ с исследуемыми сыворотками учитывать только при положительной реакции с К+ и отрицательной реакцией с К.

Качественное определение

Содержание АСО в образцах, давших отрицательную РАЛ, считается соответствующим норме (ниже 200 МЕ/мл – для взрослых, ниже 100 МЕ/мл – для детей до 5 лет).

Содержание АСО в образцах, давших положительную РАЛ, считается превышающим норму (200 МЕ/мл и выше).

Образцы, давшие положительную РАЛ, подлежат дополнительному исследованию (титрованию) для определения концентрации АСО.

Количественное определение

По результатам титрования определить титр АСО – максимальное разведение, в котором получена положительная РАЛ.

Рассчитать концентрацию АСО в исследуемом образце по формуле:

Концентрация АСО (МЕ/мл)=200 МЕ/мл×(величина, обратная титру АСО)

       где   200 МЕ/мл –  минимальная концентрация АСО, определяемая в РАЛ;

Пример:

Максимальное разведение = 1:8;  титр АСО = 1:8;

концентрация АСО = 200´8 = 1600 МЕ/мл.

Положительная реакция указывает на острую стрептококковую инфекцию, поэтому в этом случае тест необходимо повторить через неделю, чтобы выявить динамику заболевания.

Повышенное содержание АСО характерно для пациентов, страдающих скарлатиной, острым ревматоидным артритом, ревматической лихорадкой, гломерулонефритом, тонзиллитом и другими стрептококковыми инфекциями, а также для клинически здоровых бактерионосителей.

Если концентрация АСО в пробе более 1500 МЕ/мл может наблюдаться эффект прозоны.

Для исключения этого сыворотку рекомендуется перед контролем разводить.

Ложноположительные результаты могут наблюдаться в случае ревматоидного артрита, тонзиллита и у некоторых здоровых бактерионосителей.

Ложноотрицательные результаты могут наблюдаться у детей в возрасте от 6 месяцев до 2 лет и на ранних стадиях инфицирования.

Клинический диагноз не должен основываться на заключении результата одного теста и должен объединять клинические и лабораторные данные исследования.

 

  1. ФОРМА ВЫПУСКА

Набор выпускается в комплектации:

Наименование компонента
АСО-латексный

реагент

5,0 мл- 1 фл.
К+ 0,5 мл- 1 фл.
К 0,5 мл- 1 фл.
ФР- 25 мл- 1 фл.
Карточки для постановки реакции 25 шт.
  1. СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ

И ТРАНСПОРТИРОВКИ

Срок годности набора – 2 года.

Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 8 оС в течение всего срока годности. Замораживание не допускается.

Набор транспортируют при температуре от 2 до 8 оС; допускается транспортирование при температуре от 9 до 25 оС в течение 10 сут. Замораживание не допускается.

Неиспользованные реагенты хранят в герметично укупоренной таре при температуре  от 2 до 8 оС до истечения срока годности набора.

 

По вопросам, касающимся качества набора, следует обращаться по адресу 142530 Московская обл., г. Электрогорск, ул. Буденного, д. 1, ЗАО “ЭКОлаб”; тел. (49643) 3-23-11, факс (49643) 3-30-93 – отдел сбыта, (49643) 3-37-30 – ОБТК

Скачать инструкцию

Скачать РУ

 

АСО латекс-тест

0

TOP