Гемофилус агар Оболенск

ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для бактериологических исследований ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ И ВЫДЕЛЕНИЯ ГЕМОФИЛЬНОЙ ПАЛОЧКИ, ГОТОВАЯ К ПРИМЕНЕНИЮ ГЕМОФИЛУС АГАР Оболенск

1. назначение Гемофилус агар Оболенск

«Питательная среда для культивирования и выделения гемофильной палочки, готовая к применению Гемофилус агар» предназначена для бактериологических исследований в клинической микробиологии с целью культивирования  и выделения бактерий рода Haemophilus.

2. характеристика Гемофилус агар Оболенск

Гемофилус агар Оболенск представляет набор, состоящий из основы среды (далее – Основа) – 1 флакон, ростовой добавки (РД) – 1 флакон и селективной добавки (СД)  – 1 флакон.

Основа представляет собой непрозрачный гель темно-коричневого или черного цвета, стерильный, разлитый по 100 мл во флаконы вместимостью 100 мл, РД – пористая масса белого цвета, стерильная, расфасована во флаконы вместимостью 10 мл, СД – порошок белого цвета, расфасован во флаконы вместимостью 10 мл.

3. Принцип действия Гемофилус агар Оболенск

Основа, содержащая стимулятор роста гемофильных микроорганизмов, обогащена фактором Х (гемин). Другой фактор, необходимый для роста бактерий рода Haemophilus (V-фактор – никотинамидадениндинуклеотид – НАД), содержится в РД. Совокупность компонентов, входящих в состав набора (Основа, РД и СД) обеспечивает рост бактерий рода Haemophilus, образование капсулы у капсульных форм Haemophilus influenzae и ингибирование микробов-ассоциантов.

4. состав, г/л:

Состав Основы, г/л:

Панкреатический гидролизат казеина……………………………..	15,0
Стимулятор роста гемофильных микроорганизмов………………	12,0
Дрожжевой экстракт ………………………………………………..	5,0
Пептон ……………………………………………………………….	5,0
Калий фосфорнокислый однозамещенный ……………………….	0,8
Натрий хлористый …………….……………………………………	1,0
Крахмал растворимый ……………………………………………..	1,0
Агар микробиологический …………………………………………	12,0±2,0
Вода дистиллированная …………………………………………….	1000 мл

Флакон с РД содержит 0,1 мг НАД.

Флакон с СД содержит 30 мг бацитрацина.

 

5. аналитические и диагностические характеристики Гемофилус агар Оболенск

Гемофилус агар Оболенск обеспечивает рост тест-штаммов Haemophilus influenzae 423(тип b) и Haemophilus influenzae АТСС 9006 при посеве по 0,1 мл взвеси каждого тест-штамма из разведения 10^-6 через 18-24 ч инкубации посевов при температуре (37±1) °С в атмосфере 5-10 % СО₂ в виде слизистых, круглых, сероватого цвета, полупрозрачных колоний диаметром до 2 мм.

Питательная среда полностью подавляет рост тест-штаммов микробов-ассоциантов: Streptococcus pyogenes Dick-1, Neisseria meningitidis A 208 при посеве 0,1 мл взвеси из разведения 10^-4 через 48 ч инкубации при температуре (37±1)^о С. N.meningitidis A-208 культивируют в атмосфере 5-10 % СО₂.

Взвеси используемых тест-штаммов микроорганизмов готовятся по стандартному образцу мутности на 10 ед (ОСО 42-28-85 П) путем ряда десятикратных разведений.

6. меры предосторожности Гемофилус агар Оболенск

При работе с образцами и микробными культурами необходимо соблюдать «Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения» (Москва, 1981г.) и СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV группы патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней».

– Не использовать компоненты Гемофилус агара по истечении срока годности

– Не использовать флаконы набора Гемофилус агара со следами контаминации.

– После смешивания компонентов Гемофилус агар следует полностью использовать (не плавить повторно!).

7. оборудование и материалы Гемофилус агар Оболенск

• Термостат, обеспечивающий температуру (37±1) °С;
• генераторы атмосферы, обогащенной 5-10% СО_2, или парафиновая свеча;
• контейнер для инкубации (анаэростат или «свечной» сосуд);
• водяная баня или автоклав, работающий в режиме “стерилизации текучим паром”;
• чашки Петри;
• пипетки стеклянные, позволяющие отбирать объемы жидкости 2 мл;
• вода дистиллированная, стерильная.

8. анализируемые образцы Гемофилус агар Оболенск

Клинический материал от больных гнойным бактериальным менингитом и другими заболеваниями инфекционной природы, вызываемыми бактериями рода Haemophilus. Среду можно использовать также при работе с чистыми культурами Haemophilus.

9. проведение анализа Гемофилус агар Оболенск

Исследования образцов проводятся в соответствии с рекомендациями, изложенными в Методических рекомендациях для микробиологов “Выделение, идентификация и определение чувствительности к антибиотикам Haemophilus influenzae“, КМАХ. – 2000. – Т. 2. – С. 93-109 и МУК 4.2.1887-04 «Лабораторная диагностика менингококковой инфекции и гнойных бактериальных менингитов».

9.1. Подготовка к анализу

Подготовка раствора ростовой добавки.

1. Выдержите флакон с РД до достижения комнатной температуры.
2. В асептических условиях растворите содержимое флакона с РД в 2 мл стерильной дистиллированной воды.
3. Перемешайте до полного растворения.

Приготовление чашек со средой.

1. Не вскрывая, поместите флакон с Основой на водяную баню с температурой 50 °С и поднимите температуру до 95 °С, выдерживайте приблизительно 30-40 минут до полного растворения агара. Возможно расплавление Основы в автоклаве в режиме «стерилизации текучим паром».
2. Перемешайте.
3. Охладите Основу до 45-50 °С.
4. Вскройте флакон с Основой и внесите в охлажденную Основу ростовую добавку из расчета содержимое 1 флакона с РД (2 мл) на 100 мл Основы (содержимое 1 флакона с Основой).
5. При необходимости вместе с РД внесите СД из расчета 1 флакон на 1 флакон Основы, предварительно растворив ее в 2 мл стерильной дистиллированной воды. (После растворения РД и СД не хранить, использовать немедленно.)
6. Перемешайте и разлейте в чашки Петри (18-20 мл на чашку).
7. Чашки с готовой средой можно хранить при температуре 4-8 °С не более 7 дней без заметного изменения ростовых свойств.

   • Посев и инкубация

8. Перед посевом выдержите чашки со средой до достижения комнатной температуры.
9. Произведите посев на чашки сразу после получения образцов.
10. Инкубируйте чашки в атмосфере, обогащенной 5-10% СО
11. Инкубируйте чашки в перевернутом положение (крышкой вниз) при температуре 37 °С, Время инкубации зависит от типа образца и целей исследования. Как правило, учет результатов проводится через 24-48 ч.

12. Учет результатов Гемофилус агар Оболенск

Учет результатов проводят визуально в соответствии с «Методами контроля бактериологических питательных сред: Методические указания (МУК 4.2.2316-08)». Через 24 ч инкубации штаммы H. influenzae формируют слизистые, сочные, полупрозрачные, гладкие колонии сероватого цвета диаметром до 2 мм.

Для чистой культуры гемофильной палочки характерно наличие специфического “мышиного” запаха.

11. условия хранения и эксплуатации набора Гемофилус агар Оболенск

Флаконы с Основой необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре от 2 до 30 С. Флаконы с РД и СД хранить герметично закрытыми при температуре 2-8 °С.

Срок годности – 1 год.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.

По вопросам, касающимся качества набора реагентов «Питательная среда для культивирования и выделения гемофильной палочки, готовая к применению (Гемофилус агар)» в течение срока годности следует обращаться в адрес предприятия-изготовителя: 142279 Оболенск, Московская обл., Серпуховский р-н, ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии», тел. (4967) 36-00-20, факс 36-01-16.

Скачать Инструкцию 

Скачать РУ

Скачать прайс-лист

Гемофилус агар Оболенск