Среда Гисса с маннозой Биотехновация
Питательная среда Гисса («пестрый ряд») — дифференциально – диагностические среды, используемые для выявления сахаролитической активности бактерий. В дистиллированной воде растворяют 1% пептона и 0,5% поваренной соли. Затем прибавляют 1% индикатора Андреде или 0,1% спиртового раствора бромтимолового синего и нагревают до t° 80°; затем доводят рН до 7,2 (при комнатной температуре).
Полужидкая питательная среда для идентификации энтеробактерий по тесту ферментации одного из углеводов (лактозы, глюкозы, сахарозы, мальтозы, арабинозы, фруктозы, маннозы, ксилозы, рамнозы, раффинозы, галактозы) или из многоатомных спиртов (маннита, дульцита, инозита, сорбита).
Среду Гисса выпускают полужидкой с индикатором BP (смесь водного голубого и розоловой кислоты). Используют, в частности, для идентификации энтеробактерий.
Питательная среда Гисса с маннозой – состав (в пересчете на 1 л готовой среды):
- Пептон ферментативный – 4,8 г.
- Натрия хлорид – 4,0 г.
- Агар микробиологический – 3,0 г.
- Калий фосфорнокислый двузамещенный – 0,2 г.
- Натрий углекислый – 0,02 г.
- Бромкрезоловый пурпурный – 0,02 г.
- Манноза – 4,0 г.
16 г сухой среды размешать в 1 л очищенной воды, кипятить 2-3 мин до полного расплавления агара, профильтровать, разлить по 4 мл в стерильные пробирки и автоклавировать в течение 20 мин при температуре 112оС. Готовая среда должна быть прозрачной пурпурного или розового цвета.
Готовую среду до использования можно хранить в темном месте не более 14 сут при температуре 2-8°С.
Посевы исследуемых образцов инкубируют 18-20 ч при температуре 37оС. При росте микроорганизмов, ферментирующих углевод, наблюдается изменение цвета среды с бромкрезоловым пурпурным с пурпурного на желтый. Газообразование сопровождается появлением пузырьков в столбике среды или на ее поверхности. Рост микроорганизмов, не ферментирующих углевод, не изменяет цвет среды.
Потенциальный риск применения набора – класс 2б (Приказ МЗ РФ № 4н от 06.06.2012г.). Меры предосторожности при использовании по назначению готовых питательных сред – соблюдение требований СП 1.3.2322-08 Безопасность работы с микроорганизмами III – IV групп патогенности (опасности) и гельминтами и возбудителями паразитарных инфекций.
Утилизация сухих сред с истекшим сроком хранения и использованных готовых питательных сред – в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.728-99 Правила сбора, хранения и удаления отходов лечебно-профилактических учреждений.
Хранение – в упаковке предприятия-изготовителя в сухом, защищенном от света месте при температуре от оС до 25оС. Замораживание не допускается.
Транспортирование – при температуре от 2С до 25С. Замораживание не допускается.
Фасовка 0,1 кг.
