Иерсиния-агар Оболенск
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для бактериологических исследований
«Питательная среда для выделения возбудителей кишечного
иерсиниоза и псевдотуберкулеза сухая» Иерсиния-агар Оболенск
-
НАЗНАЧЕНИЕ
«Иерсиния-агар Оболенск» предназначен для бактериологических исследований в санитарной и клинической микробиологии с целью выделения возбудителей кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза при диагностике инфекционных заболеваний «in vitro».
- характеристика набора
«Иерсиния-агар Оболенск» представляет собой мелкодисперсный гигроскопичный порошок желто-зеленого цвета.
Выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г.
2.1. ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ
Совокупность компонентов, входящих в состав набора, обеспечивает питательные потребности для роста, дифференциации возбудителей кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза, а также ингибиции отдельных видов микроорганизмов.
2.2. СОСТАВ набора
«Иерсиния-агар» представляет собой смесь сухих компонентов из расчета, г/л:
| Панкреатический гидролизат рыбной муки……………….. | 23,5 |
| Желчь очищенная, сухая ……………………………….. | 4,0 |
| Натрия хлорид …………………. ……………………………… | 3,0 |
| Д-глюкоза …………………………………………………. | 10,0 |
| Мочевина ….…………………………………………….. | 5,0 |
| Бромтимоловый синий …………………………………..…….. | 0,128 |
| Натрий углекислый………………………………………….……… | 0,1-0,3 |
| Бриллиантовый зеленый …………………………………………. | 66×10-5 |
| Агар микробиологический ………………………………. | 10,0±3,0 |
-
АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
«Иерсиния-агар Оболенск» должен обеспечивать рост тест – штаммов Yersinia enterocolitica 287-II, Yersinia pseudotuberculosis III на всех засеянных чашках Петри при посеве по
0,1 мл микробной взвеси из разведения 10-7 за время культивирования от 24 до 48 ч при температуре (28±1) °С.
При визуальном просмотре чашек колонии указанных штаммов должны выглядеть следующим образом:
Y.enterocolitica 287-II – круглые, гладкие, блестящие, сине-зеленые, диаметром не менее 1,5 мм;
Y.pseudotuberculosis III – матовые, шероховатые, зеленовато-синие, с фестончатым краем и темным, выпуклым центром, диаметром не менее 1,0 мм.
Дифференцирующие свойства среды. Питательная cреда должна обеспечивать дифференциацию тест-штаммов Y.enterocolitica 287-II и Y.pseudotuberculosis III от тест-штаммов E. coli 3912/41 (055:K59) и S. flexneri 1а 8516 на всех засеянных чашках Петри при посеве по 0,1 мл смеси тест-штамма Y.enterocolitica 287-II с E. coli 3912/41 (055:K59), Y.enterocolitica 287-II с S. flexneri 1а 8516, Y.pseudotuberculosis III с E. coli 3912/41 (055:K59), Y.pseudotuberculosis III с S. flexneri 1а 8516 через 48 ч инкубации при температуре (28±1) °С.
При визуальном просмотре чашек колонии указанных штаммов должны выглядеть следующим образом:
- coli 3912/41 (055:K59) – ярко-желтые, сочные, круглые, выпуклые, диаметром не менее 2,0 мм;
- flexneri 1а 8516 – желтые, плоские, диаметром не менее 1,0 мм.
Ингибирующие свойства среды. Иерсиния-агар должен полностью подавлять рост тест-штамма Staphylococcus aureus Wood-46 на всех засеянных чашках Петри при посеве 0,1 мл микробной взвеси из разведения 10-2 через 48 ч культивирования при температуре (28±1) °С.
-
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Соблюдение «Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения» (Москва, 1981 г.).
- ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
- Термостат обеспечивающий температуру 37±1 °С
- Весы лабораторные 2 класса точности
- Автоклав
- Пробирки стеклянные
- Пипетки стеклянные позволяющие отбирать объемы жидкости 1 и 2 мл
- Цилиндр стеклянный мерный вместимостью 1000 мл
- Чашки Петри стерильные
- Вода дистиллированная
- Колбы
- Воронки стеклянные
- АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Объекты исследований в санитарной, клинической микробиологии и научные исследования.
- Проведение АНАЛИЗа
Исследования образцов проводятся по соответствующим Методическим указаниям и ГОСТам.
7.1. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ
Приготовление «Иерсиния-агара».
Препарат в количестве, необходимом для приготовления конкретной серии питательной среды, размешивают в 1 л дистиллированной воды, нагревают до кипения и кипятят 5 мин на медленном огне. Затем фильтруют через ватно-марлевый фильтр и вновь кипятят 1-2 мин. Охлаждают до 45-50 °С и разливают в чашки Петри слоем 5-6 мм, закрывают крышками и ставят для застывания. Перед посевом чашки со средой подсушивают на рабочем столе с открытыми крышками в течение 30-40 мин.
Разлитая в чашки Петри среда может быть использована в течение 2-х сут при температуре хранения 2-8 °С.
- РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Наличие соответствующих колоний иерсиний, их дифференциацию, а также ингиюицию отдельных видов микроорганизмов на «Иерсиния-агаре» в результате роста культур, выделенных из исследуемых образцов, регистрируют визуально.
Для получения достоверных результатов посевы образцов производить не менее, чем в трех повторностях.
-
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
«Иерсиния-агар» необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре от 2 до 30 С.
Срок годности – 1 год.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.
По вопросам, касающимся качества «Иерсиния-агара» в течение срока годности следует обращаться в адрес предприятия-изготовителя: 142279 Оболенск, Московская обл., Серпуховский р-н, ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии», тел. (4967) 36-00-20, факс 36-01-16.
