Латексная тест-система ГБМ Оболенск

Диагностический набор реагентов для быстрой идентификации возбудителей гнойных бактериальных менингитов Haemphilus influenza тип b,Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitides типа А, Neisseria meningitides типа В, Neisseria meningitides тип С и Neisseria meningitides тип W 135 в рекции латекс-агглютинации, жидкий

Латексная тест-система ГБМ Оболенск

Инструкция по применению Диагностического набора реагентов для быстрой идентификации возбудителей гнойных бактериальных менингитов – Haemophilus influenzae тип bStreptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis тип A, Neisseria meningitidis тип B, Neisseria meningitidis тип С и Neisseria meningitidis тип W 135 в реакции латекс-агглютинации, жидкого (Латексная тест-система ГБМ)

  1. Назначение тест-системы

Латексная тест-система ГБМ Оболенск предназначена для быстрой идентификации возбудителей гнойных бактериальных менингитов —Haemophilus influenzae тип b, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis тип A, Neisseria meningitidis тип B, Neisseria meningitidis тип С и Neisseria meningitidis тип W 135 методом латекс-агглютинации при проведении клинических лабораторных исследований.

Латексная тест-система ГБМ обеспечивает типоспецифическое выявление и идентификацию микробных клеток ГБМ непосредственно в образцах спинномозговой жидкости или крови,  полученных от больных людей с клиническими симптомами менингита, а также в суспензиях, полученных из колоний микроорганизмов, выращенных на плотных питательных средах.

2.Аналитические и диагностические характеристики тест-системы

Диагностическая  чувствительность Латексной тест-системы ГБМ – не менее 80%, диагностическая специфичность – не менее 90%

Латексный тест H. influenzae b (фл. № 1) должен давать реакцию агглютинации латекса (РАЛ) с микробной взвесью H. influenzae тип b, штамм 411 на 3(+)-4(+) в концентрации 109 м.к./мл.

Латексный тест H. influenzae b (фл. № 1) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: S. pneumoniae, штамм ATCC 49619; N. meningitidis тип A, штамм M4060;

  1. N. meningitidis тип B, штамм M5148; N. meningitidis тип С, штамм M3045 и N. meningitidis тип W 135, штамм M7037 в концентрациях 109 м.к./мл.

Латексный тест S. pneumoniae (фл. № 2) должен давать РАЛ с микробной взвесью S. pneumoniae штамм ATCC 49619 на 3(+)-4(+) в концентрации 109 м.к./мл.

Латексный тест S. pneumoniae (фл. № 2) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: H. influenzae тип b, штамм 411; N. meningitidis тип A, штамм M4060;
N. meningitidis
  тип B,  штамм  M5148;  N. Meningitidis тип С, штамм M3045 и N. meningitidis тип W 135, штамм M7037 в концентрациях 109 м.к./мл.

Латексный тест N.meningitidis A (фл. № 3) должен давать РАЛ с микробной взвесью N. meningitidis тип A, штамм M4060 на 3(+)-4(+) в концентрации 109 м.к./мл.

Латексный тест N.meningitidis A (фл. № 3) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: H. influenzae тип b, штамм 411; S. pneumoniae, штамм ATCC 49619;
N. meningitidis тип B, штамм M5148; N. meningitidis тип С, штамм M3045 и N. meningitidis тип W 135, штамм M7037 в концентрации 109 м.к./мл.

Латексный тест N.meningitidis B (фл. № 4) должен давать РАЛ с микробной взвесью N. meningitidis тип B, штамм M5148 на 3(+)-4(+) в концентрации 109 м.к./мл.

Латексный тест N.meningitidis B (фл. № 4) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: H. influenzae тип b, штамм 411; S. pneumoniae, штамм ATCC 49619;
N. meningitidis тип A, штамм M4060; N. meningitidis тип С, штамм M3045 и N. meningitidis тип W 135, штамм M7037 в концентрации 109 м.к./мл.

Латексный тест N.meningitidis С (фл. № 5) должен давать РАЛ с микробной взвесью N. meningitidis тип С, штамм M3045 на 3(+)-4(+) в концентрации 109 м.к./мл.

Латексный тест N.meningitidis С (фл. № 5) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: H. influenzae тип b, штамм 411; S. pneumoniae, штамм ATCC 49619;
N. meningitidis тип A, штамм M4060; N. meningitidis тип B, штамм M5148 и N. meningitidis тип W 135, штамм M7037 в концентрации 109 м.к./мл.

Латексный тест N.meningitidis W 135 (фл. № 6) должен давать РАЛ с микробной взвесью N. meningitidis тип W 135, штамм M7037 на 3(+)-4(+) в концентрации
109 м.к./мл.

Латексный тест N.meningitidis W 135 (фл. № 6) не должен давать РАЛ с микробными взвесями: H. influenzae тип b, штамм 411; S. pneumoniae, штамм ATCC 49619;
N. meningitidis
тип A, штамм, M4060; N. meningitidis тип B, штамм M5148 и N. meningitidis тип С, штамм M3045 в концентрации 109 м.к./мл.

 

  1. Принцип действия Латексная тест-система ГБМ Оболенск

Микробные клетки возбудителей ГБМ, присутствующие в исследуемой пробе, взаимодействуют с латексными частицами, сенсибилизированными антителами против полисахаридных антигенов возбудителей ГБМ с последующим образованием видимых агглютинатов. Специфическими мишенями данного теста являются полисахаридные антигены капсул возбудителей гнойных бактериальных менингитов.

 

  1. Состав тест-системы

Латексная тест-система ГБМ Оболенск представляет собой набор, состоящий  из 13 флаконов:

  • флакон №1 (латексный тест H. influenzae b), содержит 0,5 % взвеси частиц монодисперсного полистирольного альдегидного латекса диаметром 0,85 мкм, сенсибилизированного иммуноглобулинами G, выделенными из сывороток крови кроликов, содержащих антитела к полисахаридному антигену капсулы тип b Haemophilus influenzae тип b (HIb);
  • флакон №2 (латексный тест S. pneumoniae), содержит 0,5 % взвеси частиц монодисперсного полистирольного альдегидного латекса диаметром 0,85 мкм, сенсибилизированного иммуноглобулинами G, выделенными из сывороток крови кроликов, содержащих антитела к полисахаридному антигену Streptococcus pneumoniae;
  • флакон №3 (латексный тест N.meningitidis A), содержит 0,5 % взвеси частиц монодисперсного полистирольного альдегидного латекса диаметром 0,85 мкм, сенсибилизированного иммуноглобулинами G, выделенными из сывороток крови кроликов, содержащих антитела к полисахаридному антигену Neisseria meningitidis тип A;
  • флакон №4 (латексный тест N.meningitidis B), содержит 0,5 % взвеси частиц монодисперсного полистирольного альдегидного латекса диаметром 0,85 мкм, сенсибилизированного иммуноглобулинами G, выделенными из сывороток крови кроликов, содержащих антитела к полисахаридному антигену Neisseria meningitidis тип B;
  • флакон №5

    (латексный тест N.meningitidis С), содержит 0,5 % взвеси частиц монодисперсного полистирольного альдегидного латекса диаметром 0,85 мкм, сенсибилизированного иммуноглобулинами G, выделенными из сывороток крови кроликов, содержащих антитела к полисахаридному антигену Neisseria meningitidis тип С;

  • флакон №6 (латексный тест N.meningitidis W 135), содержит 0,5 % взвеси частиц монодисперсного полистирольного альдегидного латекса диаметром 0,85 мкм, сенсибилизированного иммуноглобулинами G, выделенными из сывороток крови кроликов, содержащих антитела к полисахаридному антигену N. meningitidis тип W 135;
  • флакон №7 (позитивный контроль H. influenzae b), содержит инактивированную нагреванием взвесь культуры Haemophilus influenzae тип b,штамм 411(Государственная коллекция патогенных микроорганизмов ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского), концентрация 10 единиц по ОСО 42-28-85 П.
  • флакон №8 (позитивный контроль S. pneumoniae), содержит инактивированную нагреванием взвесь культуры Streptococcus pneumoniae, штамм 19F, ATCC 49619, концентрация 10 единиц по ОСО 42-28-85 П.
  • флакон №9 (позитивный контроль N.meningitidis A), содержит инактивированную нагреванием взвесь культуры Neisseria meningitidis тип A, штамм M4060 (Государственная коллекция патогенных микроорганизмов ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского), концентрация 10 единиц по ОСО 42-28-85 П.
  • флакон №10 (позитивный контроль N.meningitidis B), содержит инактивированную нагреванием взвесь культуры Neisseria meningitidis тип B, штамм M5148 Государственная коллекция патогенных микроорганизмов ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского), концентрация 10 единиц по ОСО 42-28-85 П.
  • флакон №11 (позитивный контроль N.meningitidis С), содержит инактивированную нагреванием взвесь культуры Neisseria meningitidis тип С, штамм M3045 (Государственная коллекция патогенных микроорганизмов ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского), концентрация 10 единиц по ОСО 42-28-85 П.
  • флакон №12 (позитивный контроль N.meningitidis W 135), содержит инактивированную нагреванием взвесь культуры Neisseria meningitidis тип W 135, штамм M7037 (Государственная коллекция патогенных микроорганизмов ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского), концентрация 10 единиц по ОСО 42-28-85 П.
  • флакон №13 (контрольный латексный тест), содержит 0,5 % взвесь частиц монодисперсного полистирольного альдегидного латекса, сенсибилизированного иммуноглобулинами из сывороток крови не иммунизированных кроликов;

 

  1. Меры предосторожности

Потенциальный риск применения Латексной тест-системы ГБМ класс 3 (Приказ МЗ РФ №4н от 06.06.2012г)

Подготовку материала для исследования, его обезвреживание, а также уничтожение использованных реагентов Латексной тест-системы ГБМ проводят с соблюдением специальной техники безопасности в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности и возбудителями паразитарных болезней», Методических указаний МУК 4.2.1887-04 «Лабораторная диагностика менингококковой инфекции и гнойных бактериальных менингитов», СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами».

Утилизацию неиспользованных тест-систем с истекшим сроком годности проводят любым способом, предотвращающим повторное использование по назначению.

 

  1. Материалы и оборудование

  • физиологический раствор, рН 6,9;
  • механические дозаторы переменного объема, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,02 и 0,015 мл;
  • предметные стекла;
  • стеклянные палочки;
  • питательные среды: для культивирования и выделения гемофильной палочки (ГЕМОФИЛУС агар) ФБУН ГНЦ ПМБ; для культивирования и выделения менингококков (МЕНИНГОАГАР) (HiMedia) или аналогичные среды других фирм-производителей с характеристиками не хуже заявленных, зарегистрированных в установленном порядке.

 

7.Анализируемые образцы

7.1.Образцы спинномозговой жидкости или крови, полученные от больных людей с подозрением на гнойный бактериальный менингит.

7.2.Колонии микроорганизмов, выделенных из клинического материала, выращенные на плотных питательных средах в микроаэрофильных условиях в течение 24-48 часов при температуре 37 °С.

Примечание – Анализируемые образцы не подвергать автоклавированию.

  1. Подготовка к выполнению анализа

Извлечь из холодильника Латексную тест-систему ГБМ и выдержать при комнатной температуре 20 минут.

Примечание – перед применением латексный тест тщательно суспендировать до гомогенного состояния.

Латексная тест-система ГБМ Оболенск

9.Проведение анализа

Взятие,  посев и хранение исследуемого материала проводить в соответствии с МУК 4.2.1887-04 «Лабораторная диагностика менингококковой инфекции и гнойных бактериальных менингитов»

9.1. Анализируемый образец ( по п.7.1.) объемом по 0,02 мл, механическим дозатором 6 раз нанести на предметное стекло в виде капель, затем внести в каждую полученную каплю образца по  0,015 мл одного из специфических латексных тестов из флаконов №1-6  и оба компонента в каждой капле осторожно перемешать  стеклянной палочкой (для каждой смеси отдельной палочкой) до получения гомогенной суспензии. Реакционную смесь на стекле инкубировать при комнатной температуре 2 минуты, периодически покачивая, а затем регистрировать результаты реакции.

9.2.  Идентификация микробных клеток ГМБ ( по п 7.2.): из колоний, выросших на плотной питательной среде — на предметное стекло нанести 20 мкл физиологического раствора, стеклянной палочкой снять часть колонии тестируемого штамма (исследуемый образец) и растереть в капле физиологического раствора до получения гомогенной суспензии. Далее проводить идентификацию по п.9.1.

9.3. Проверка качества контрольного латексного теста. К 0,02 мл анализируемого образца, нанесенного на предметное стекло, добавить 0,015 мл контрольного латексного теста (флакон №13) и оба компонента осторожно перемешать стеклянной палочкой до получения гомогенной суспензии. Реакционную смесь на стекле инкубировать при комнатной температуре 2 минуты, периодически покачивая, а затем регистрировать результаты реакции.

9.4   Контроль специфичности латексного теста. К 0,02 мл позитивного контроля (флаконы №7-12), нанесенного на предметное стекло, добавить 0,015 мл специфического латексного теста (флаконы № 1-6) и оба компонента осторожно перемешать стеклянной палочкой до получения гомогенной суспензии. Реакционную смесь на стекле инкубировать при комнатной температуре 2 минуты, периодически покачивая, а затем регистрировать результаты реакции.

  1. Регистрация и учет результатов Латексная тест-система ГБМ Оболенск

Учет результатов по п. 9.1;.9.2;.9.3. провести через 2 минуты, руководствуясь таблицей и иллюстрацией.

 

Таблица 1 – Интерпретация результата (Пример идентификации Haemophilus influenzae тип b)

Положительный результат Наличие видимой четкой окрашенной агглютинации частиц после добавления к исследуемому образцу латексного теста H. influenzae b (флакон №1).

Наличие видимой четкой окрашенной агглютинации частиц после добавления к позитивному контролю H. influenzae b (флакон №7) латексного теста H. influenzae b (флакон №1).

Отсутствие агглютинации, фон равномерно мутный после добавления к исследуемому образцу контрольного латексного теста (флакон №13).

Отрицательный результат Отсутствие агглютинации, фон равномерно мутный после добавления к исследуемому образцу латексного теста H. influenzae b (флакон №1).

Наличие видимой четкой окрашенной агглютинации частиц  после добавления к позитивному контролю H. influenzae b (флакон №7) латексного теста H. influenzae b (флакон №1).

Тест не работает Отсутствие агглютинации, фон равномерно мутный после добавления к позитивному контролю H. influenzae b (флакон №7) латексного теста

 H. influenzae b (флакон №1).

 

 

  1. Условия хранения и эксплуатации латексной тест-системы

«Диагностический набор реагентов для быстрой идентификации возбудителей гнойных бактериальных менингитов – Haemophilus influenzae тип b, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis тип A, Neisseria meningitidis тип B, Neisseria meningitidis тип С и Neisseria meningitidis тип W 135 в реакции латекс-агглютинации, жидкого (Латексная тест-система ГБМ Оболенск)» необходимо хранить в закрытых флаконах в защищенном от света месте при температуре 2-8 ºС. После первого вскрытия флаконы с реагентами Латексной тест-системы ГБМ до окончания срока годности необходимо хранить в  закрытых флаконах в защищенном от света месте при температуре 2-8 ºС  .

Латексную тест-систему ГБМ транспортируют всеми видами транспорта при соблюдении условий хранения  или при температуре от 2 до 25 ºС в срок не более 7суток.

Примечание – Не замораживать.

Срок годности – 1 год. Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.

По вопросам, касающимся качества «Диагностического набора реагентов для быстрой идентификации возбудителей гнойных бактериальных менингитов – Haemophilus influenzae тип b, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis тип A, Neisseria meningitidis тип B, Neisseria meningitidis тип С и Neisseria meningitidis тип W 135 в реакции латекс-агглютинации, жидкого (Латексная тест-система ГБМ Оболенск)»  в течение срока годности следует обращаться в адрес предприятия-изготовителя: 142279, Московская область, Серпуховский район, пос.Оболенск, тел.8 (4967) 36-01-16.

Скачать Инструкцию 

Скачать РУ

Скачать прайс-лист

Латексная тест-система ГБМ Оболенск

0

TOP

X