Набор дисков Расширенный для определения чувствительности грибов – 011224 – 6 препаратов по 100 дисков: амфотерицин В, нистатин, клотримазол, флуконазол, итраконазол, кетоконазол.
Расширенный набор дисков для определения чувствительности грибов к противомикробным лекарственным средствам
(№ 011224)
Диски предназначены для определения чувствительности дрожжеподобных грибов рода Кандида к амфотерицину В, нистатину, клотримазолу, флуконазолу, итраконазолу и кетоконазолу.
Диски подлежат хранению в плотно закрытых флаконах, в сухом, защищенном от света месте, при температуре 2 – 6°С. Поскольку диски с противогрибными препаратами не являются самостерилизующимися, необходимо бранши пинцета перед извлечением диска провести над пламенем горелки и остудить. При соблюдении перечисленных правил срок хранения дисков – 12 месяцев (указан на этикетке).
Техника постановки анализа
1.Питательная среда
Рекомендуется использовать агаризованную среду Сабуро с pH не ниже 6,0. Для дисков с амфотерицином В, нистатином и клотримазолом может быть использована среда МПА.
Среду расплавляют на водяной бане, охлаждают до 50 – 60ْ С и разливают по 20 мл в чашки Петри. Готовые чашки со средой рекомендуется хранить в холодильнике при температуре 2 – 6°С, чтобы предупредить высыхание среды. Срок хранения – не более 7 суток.Если на поверхности среды есть конденсат, необходимо подсушить чашки со средой в термостате.
2.Приготовление инокулюма
Готовят взвесь 24 – 48 часовой культуры гриба в изотоническом растворе хлорида натрия по оптическому стандарту мутности 5 ЕД(без пересчета на размер клетки гриба). Готовую взвесь разводят изотоническим раствором хлорида натрия в 10 раз.
3.Инокуляция
Около 1 – 2 мл взвеси наносят на поверхность чашки с питательной средой и покачиванием чашки равномерно распределяют взвесь по всей поверхности среды.
Пипеткой удаляют избыток взвеси и приоткрытые чашки подсушивают при комнатной температуре 15 минут.
4.Наложение дисков
Диски располагают по поверхности агара на равном расстоянии друг от друга и плотно прижимают к среде. Не следует помещать на чашку более 5 дисков.
5.Преддиффузия
При использовании дисков с итраконазолом, флуконазолом и кетоконазолом чашки с дисками помещают в холодильник (2 – 6°С) на 1 час; при использовании дисков с амфотерицином В, нистатином и клотримазолом – в холодильник на 2 часа.
6.Инкубация
Чашки с дисками инкубируют в термостате при 25 – 27°С в течение 40 – 48 часов.
- Учет результатов по диаметру зоны подавления роста культуры
| Противогрибные
препараты в диске |
Диаметр зон (мм) подавления роста культур | ||
| Устойчивых | Промежуточных
(чув-ть зависит от дозы) |
Чувствительных | |
| Амфотерицин В | <14 | – | ³14 |
| Нистатин | <18 | – | ³18 |
| Клотримазол | <12 | – | ³12 |
| Флуконазол | £19 | 20-28 | ³29 |
| Итраконазол* | £13 | 14-18 | ³19 |
| Кетоконазол* | £19 | 20-25 | ³26 |
* Предварительные данные.
По всем методическим вопросам, возникшим при работе с дисками, просим обращаться по телефону/ факсу: (812) 327-55-81, 320-71-38.
