Ротаскрин-латекс-тест

Ротаскрин-латекс-тест

Инструкция по применению набора реагентов «ЭКОлатекс» комплект «Ротаскринлатекс-тест «

 

Диагностикум латексный для выявления ротавирусного антигена

 

Регистрационное удостоверение № РЗН 2013/248  от  28.02.2013 г.

НАЗНАЧЕНИЕ

Выявление ротавирусного антигена в фекалиях пациентов с помощью реакции агглютинации латекса (РАЛ).

ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ

При наличии в исследуемом образце ротавирусов они взаимодействуют с кроличьими антителами к пулу ротавирусных изолятов, иммобилизованными на поверхности латексных частиц. Результатом взаимодействия является агглютинация латекса с образованием мелких или крупных зерен, различимых визуально.

СОСТАВ НАБОРА

Латексный тест-реагент – суспензия монодисперсного полистирольного латекса с иммобилизованными на поверхности его частиц кроличьими антителами к пулу ротавирусных изолятов; суспензия белого цвета, при хранении разделяется на осадок белого цвета, легко разбивающийся при встряхивании, и прозрачную или слегка опалесцирующую надосадочную жидкость                                                                                1 флакон (2,5 мл).

Латексный контрольный реагент – суспензия монодисперсного полистирольного латекса с иммобилизованным на поверхности его частиц нормальным кроличьим глобулином;   суспензия белого цвета, при хранении разделяется на осадок белого цвета, легко разбивающийся при встряхивании, и прозрачную или слегка опалесцирующую надосадочную жидкость                                                                                                                                                                   1флакон (2,5 мл).

Контрольный положительный образец (К+) – инактивированные бычьи ротавирусные изоляты в забуференной культуральной среде с антибиотиками прозрачная розового цвета жидкость                                                                                                                    1 флакон (1,0 мл).

Раствор для разведения образцов (РРО) — прозрачная бесцветная жидкость                                                                                                                                                                1 флакон (50 мл).

Примечание. Все реагенты содержат в качестве консерванта 0,099 % азида натрия.

Набор дополнительно комплектуется одноразовыми карточками (10шт.) для постановки реакции.

Базовая комплектация рассчитана на исследование 50 образцов, включая контрольные

По желанию потребителя базовая комплектация набора (число индивидуальных упаковок с реагентами и их объемы) может быть изменена.

ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА

Чувствительность – 100%.

Специфичность – 99,3%.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Набор биологически безопасен, однако при работе с исследуемыми образцами необходимо обращаться с ними как с потенциально инфицированными материалами

Все реагенты набора содержат в качестве консерванта токсичное вещество — азид натрия; при использовании набора необходимо соблюдать правила безопасной работы с токсичными материалами.

СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ

Исследуемые образцы

Используются, как правило, свежеотобранные пробы фекалий, но при необходимости допускается их хранение при температуре  от 2 до 8 оС до 1 сут. или более длительное хранение при минус 20 оС.

 

 

Оборудование и материалы

Центрифуга лабораторная.

Пробирки с пробками или завинчиваемыми крышками.

Дозаторы (пипетки полуавтоматические одноканальные).

Пипетки Пастеровские.

Подготовка реагентов и материалов

Выдержать все компоненты диагностикума не менее 30 мин при комнатной температуре.

Подготовить  необходимое число карточек для постановки реакции (промаркировать ячейки соответственно исследуемым образцам; для каждого образца используется по две ячейки: первая – для латексного тест-реагента, вторая – для контрольного реагента; две ячейки использовать для РАЛ с К+).

Из каждого исследуемого образца непосредственно перед исследованием приготовить приблизительно 10 % взвесь в РРО, для чего в пробирку с пробкой или завинчиваемой крышкой налить 1 мл РРО, внести около 0,1 мл (0,1 г) образца фекалий и тщательно перемешать содержимое. Полученную взвесь центрифугировать в течение 10 мин при комнатной температуре при 2000-2500 об/мин, отобрать супернатант и исследовать его в РАЛ.

Проведение  РАЛ

Тщательно, но не допуская вспенивания, перемешать латексные реагенты.

Внести по 50 мкл К+   в соответствующие ячейки карточки.

В первую ячейку внести 1 каплю (50 мкл) латексного тест-реагента, во вторую – 1 каплю (50 мкл) контрольного реагента.

Внимание! Для каждого реагента использовать отдельную пипетку (отдельный наконечник).

Концом пипетки, использованной для внесения реагента,  перемешать содержимое каждой ячейки, распределяя его по всей поверхности лунки.

Осторожно покачивая карточку, наблюдать развитие РАЛ не дольше 2 мин.

Аналогично провести РАЛ с супернатантами всех исследуемых образцов.

УЧЕТ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

Учет результатов проводить визуально на темном фоне при хорошем освещении.

Результаты РАЛ учитывается следующим образом:

положительная реакция – наличие агглютинации латекса (появление зернистости или различимых частиц);

отрицательная реакция – агглютинация полностью отсутствует (жидкость в ячейке остается мутной и однородной).

Результаты реакции с исследуемыми образцами учитываются только при положительной реакции Кс латексным тест — реагентом и отрицательной реакции Кс контрольным латексным реагентом.

Интерпретация результатов

Образец, давший положительную РАЛ с тест-реагентом и отрицательную РАЛ с контрольным реагентом, считается положительным, т.е. содержит ротавирусы

Образец, давший отрицательную РАЛ с обоими реагентами, считается отрицательным, т.е. не содержит ротавирусы.

Положительная РАЛ с контрольным реагентом свидетельствует о непригодности образца для исследования данным методом.

Результаты теста должны рассматриваться только в совокупности с клиническими проявлениями и результатами других лабораторных исследований.

Ротаскрин-латекс-тест рассматривается как тест острой фазы заболевания. По ее завершении концентрация ротавирусного антигена в образцах фекалий может быть ниже чувствительности теста.

Внутренний контроль качества

Обеспечивается контролем обоих реагентов с использованием К+.

Оба реагента необходимо также периодически (1 раз в месяц) контролировать на неспецифическую РАЛ с использованием физиологического раствора.

.

ОГРАНИЧЕНИЯ ПРОЦЕДУРЫ

Результаты тестирования образов пациентов диагностикумом  Ротаскрин-латекс-тест следует соотносить с клинической симптоматикой. Ложноотрицательные результаты могут быть следствием ненадлежащего сбора образцов, или исследования образца, взятого на поздней стадии болезни, когда концентрация вирусного антигена в фекалиях мала.

СРОК ГОДНОСТИ

Срок годности набора – 2 года. Набор с истекшим сроком годности применению не подлежит.

 

ХРАНЕНИЕ И ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ

Хранение

В упаковке предприятия-изготовителя при температуре от 2 до 8 оС. Замораживание не допускается.

Транспортирование

При температуре от 2 до 8 оС. Замораживание не допускается. Допускается транспортирование при температуре от 9 до 25 оС в течение 10 сут.

 

УСЛОВИЯ ОТПУСКА

Для лечебно-профилактических учреждений.

 

По вопросам, касающимся качества набора, следует обращаться по адресу 142530, Московская обл., г. Электрогорск, ул. Буденного, д.1, тел: (49643)3-1374, 3-2311,факс 3-30-85

Ротаскрин-латекс-тест

0

TOP

X