СРБ латекс-тест

СРБ латекс-тест  Комплект №1 250 определений (Набор реагентов  для  определения С-реактивного белка в реакции агглютинации латекса (качественный и количественный анализ) (12.01)

Инструкция по применению набора реагентов “СРБ ЛАТЕКС-ТЕСТ”

 Набор реагентов для определения С-реактивного белка в реакции агглютинации латекса

Регистрационное удостоверение  № ФСР 2011/12205 от 03.11.11 г.

 

  1. НАЗНАЧЕНИЕ[1]

Для выявления и определения содержания СРБ в сыворотке крови человека методом реакции агглютинации латекса (РАЛ). СРБ является белком острой фазы, концентрация которого возрастает при воспалительных процессах, повреждениях тканей, бактериемии и вирусных инфекциях. При воспалительных процессах, связанных с бактериальными инфекциями, концентрация СРБ может повышаться до 300 мг/л за 12-24 часа.

  1. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА

2.1. Принцип действия

При наличии в исследуемой пробе СРБ он взаимодействует с соответствующими антителами, находящимися на поверхности латексных частиц. Результатом взаимодействия является агглютинация латекса с образованием мелких или крупных зерен, различимых визуально.

2.2. Состав набора

СРБ-латексный реагент – суспензия монодисперсного полистирольного латекса с иммобилизованным на поверхности его частиц иммуноглобулином (IgG) к СРБ человека; суспензия белого цвета, при хранении разделяется на осадок белого цвета, легко разбивающийся при встряхивании, и бесцветную прозрачную или слегка опалесцирующую надосадочную жидкость. Чувствительность СРБ-латекса откалибрована относительно  референсного материала CRM 470/RPPHS.

Физиологический раствор (ФР) – 0,9 % раствор натрия хлорида; содержит консервант – азид натрия в конечной концентрации 0,1 %; прозрачная бесцветная жидкость

Положительная контрольная сыворотка (К+) – жидкая сыворотка крови человека, инактивированная прогреванием при 56° С в течение 1 ч, содержащая СРБ в концентрации не менее 12 мг/л, дающая отрицательную реакцию на HBsAg и не содержащая антител к ВИЧ-1, ВИЧ-2 и ВГС; консервант – натрия азид, в конечной концентрации 0,1 %. Прозрачная бесцветная или от желтоватого до красно-коричневатого цвета жидкость.

Отрицательная контрольная сыворотка (К) – жидкая сыворотка крови человека, инактивированная прогреванием при 56° С в течение 1 ч, содержащая СРБ в концентрации менее 6 мг/л, дающая отрицательную реакцию на HBsAg и не содержащая антител к ВИЧ-1, ВИЧ-2 и ВГС; консервант – натрия азид, в конечной концентрации 0,1 %. Прозрачная или желтоватого цвета жидкость.

  1. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА

Набор рассчитан на проведение 250 исследований, включая контрольные образцы.

Набор позволяет обнаруживать СРБ в неразведенной сыворотке крови человека в концентрации от 6 мг/л и выше.

  1. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Набор биологически безопасен, но при работе с исследуемыми образцами сыворотки необходимо обращаться с ними как с потенциально инфицированными материалами.

  1. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ

– Шейкер орбитальный (любой марки с амплитудой колебаний 10-20 мм).

– Градуированные пипетки 2 класса точности или дозаторы пипеточные.

– Микропипетки автоматические или пипетки-мешалки (на 20 мкл).

-Палочки стеклянные или пластиковые.

– Часы или таймер.

  1. ИССЛЕДУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Используется свежеполученная сыворотка крови. Использование в качестве образцов плазмы крови не допускается. Забор крови должен быть произведен согласно стандартной процедуре. Допускается хранение образцов 7 дней при 2-8 ˚С или 3 месяца  при температуре минус 20 ˚С. Не подвергать образцы повторному замораживанию и оттаиванию.

Исследуемая сыворотка должна быть прозрачной и не содержать взвешенных частиц.

Образцы, содержащие осадок, перед анализом должны быть отцентрифугированы в течении 10-15 мин при 2,5-3,0 тыс. об/мин

Не использовать гемолизированные или загрязненные образцы.

  1. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

7.1. Подготовка реагентов и материалов

Выдержать все компоненты набора и исследуемые образцы не менее 20 мин при комнатной температуре. Легким встряхиванием флакона тщательно перемешать СРБ-латексный реагент. Контрольные сыворотки и физиологический  раствор готовы к применению.

Подготовить дополнительное оборудование:

  • пластину стеклянную или карточку для постановки реакции;
  • микропипетки автоматические или пипетки-мешалки (на 10-50 мкл);
  • палочки стеклянные или пластиковые;
  • часы или таймер.

7.2. Качественное определение

Нанести на первую ячейку карточки 20 мкл К+, на соседнюю ячейку карточки – 20 мкл К. На свободные ячейки карточки нанести по 20 мкл исследуемых образцов.

Тщательно перемешанный СРБ-латексный реагент добавить по 20 мкл в каждую ячейку с образцом. Плоским концом пипетки-мешалки (стеклянной палочкой) осторожно перемешать каждую каплю, распределив реакционную смесь по всей площади ячейки. Для каждой капли использовать новую пипетку-мешалку (стеклянную палочку).

Покачивать карточку вручную или на шейкере в течение 2 мин., после чего сразу произвести учет результатов реакции.

7.3. Полуколичественное определение

Непосредственно на карточке для постановки реакции приготовить следующие разведения исследуемого образца в физиологическом растворе 9 г/л: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32 и 1:64. При необходимости число разведений можно увеличить.

Легким встряхиванием флакона перемешать СРБ-латексный реагент и добавить по 20 мкл в каждую ячейку с разведением исследуемого образца, после чего перемешать каждую каплю, как указано выше для качественного определения.

Покачивать карточку вручную или на шейкере в течение 2 мин., после чего сразу произвести учет результатов реакции.

  1. РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ

Учет результатов проводят визуально на темном фоне после внесения реагента в исследуемый образец не позднее 2 мин., при более позднем учете могут быть получены ложноположительные результаты.

Положительной РАЛ считается наличие агглютинации латекса (любое появление зернистости или различимых частиц).

Отрицательной РАЛ считается отсутствие агглютинации (жидкость в ячейке остается мутной и однородной).

Результаты реакции с исследуемыми образцами учитываются только при положительной реакции с К+ и отрицательной с К.

Качественное определение

Положительная реакция свидетельствует о наличии СРБ в исследуемой сыворотке в концентрации более 6 мг/л. Все образцы давшую положительную реакцию, подлежат дополнительному количественному исследованию.

Отрицательная реакция свидетельствует, что концентрация СРБ составляет менее 6 мг/л.

Количественное определение

По результатам титрования образца определить величину, обратную титру СРБ.

Концентрацию СРБ в образце рассчитать по формуле:

концентрация СРБ (мг/л) = 6 мг/л×(величина, обратная титру образца)

где 6 мг/л – минимальная концентрация СРБ, определяемая в РАЛ;

Пример:

Титр исследуемого образца с положительной РАЛ – 1:32;

концентрация СРБ =6 мг/л x32 = 192 мг/л

Если концентрация СРБ в пробе более1600 мг/л может наблюдаться эффект прозоны. Для исключения этого сыворотку рекомендуется разводить.

Клинический диагноз не должен основываться на заключении результата одного теста и должен объединять клинические и лабораторные данные исследования.

  1. ФОРМА ВЫПУСКА

Набор выпускается в комплектации:

Наименование компонента
СРБ-латексный

реагент

5,0 мл- 1 фл.
К+ 0,5 мл- 1 фл.
К 0,5 мл- 1 фл.
ФР- 25 мл- 1 фл.
Карточки для постановки реакции 25 шт.

 

  1. СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВКИ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА

Срок годности набора – 2 года.

Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре от 2 до 8 оС в течение всего срока годности. Замораживание не допускается.

Набор транспортируют при температуре от 2 до 8 оС; допускается транспортирование при температуре от 9 до 25 оС в течение 10 сут. Замораживание не допускается.

Неиспользованные реагенты хранят в герметично укупоренной таре при температуре  от 2 до 8 оС до истечения срока годности набора.

  1. УСЛОВИЯ ОТПУСКА

Для учреждений здравоохранения.

 

По вопросам, касающимся качества набора “СРБ латекс-тест”, следует обращаться по адресу 142530 Московская обл., г. Электрогорск, ул. Буденного, д. 1, ЗАО “ЭКОлаб”; тел. (49643) 3-23-11, факс (49643) 3-30-93 – отдел сбыта, (49643) 3-37-30 – ОБТК.

Взамен инструкции, утвержденной 22.12.2006 г.

Скачать Инструкцию 

Скачать РУ

СРБ латекс-тест

0

TOP

X