ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для бактериологических исследований «Питательный бульон  для выделения листерий Среда ПБЛ Оболенск»

  1. НАЗНАЧЕНИЕ

Набор реагентов для бактериологических исследований «Питательный бульон  для выделения листерий (Среда ПБЛ Оболенск)» предназначен для выделения листерий из клинического материала и пищевых продуктов при бактериологических исследованиях.

 

  1. характеристика НАБОРА

Набор реагентов состоит из одной банки  со средой ПБЛ и 5 флаконов с селективной добавкой (СД). *)

Среда ПБЛ Оболенск представляет собой мелкодисперсный гигроскопичный порошок светло-желтого цвета.

СД представляет собой мелкодисперсный порошок розового цвета. Порошок гигроскопичен, светочувствителен.

Среда ПБЛ Оболенск выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г, СД во флаконах по
0,045 г.

2.1. Принцип действия

Питательная среда обеспечивает оптимальные условия для роста листерий. Ингибиторы подавляют рост сопутствующей микрофлоры.

2.2. Состав

Среда ПБЛ Оболенск представляет собой смесь сухих компонентов из расчета, г/л:

Панкреатический гидролизат казеина (ПГК) …….. 10,0
Пептон мясной ………………………….…………… 15,0
Дрожжевой экстракт…….………………………..… 2,0
Литий хлористый …………………………………………….. 3,0
Натрий хлористый ………..………………………… 3,5
Натрий углекислый ………………………………… 0,1 – 0,3

 

Состав СД, г:

Полимиксина В сульфат …………………………… 0,01
Налидиксовая кислота ……………………………… 0,025
Акрифлавин ………………………………………….. 0,01

рН 6,8-7,2

Определение pH проводят потенциометрическим методом с применением стеклянного электрода в соответствии с МУК 4.2.2316-08 «Методы контроля бактериологических питательных сред» в экстракте, приготовленном путем добавления к 2,00 г сухой среды ПБЛ 100 мл дистиллированной воды, настаивания с периодическим перемешиванием в течение 1 ч при температуре 18 – 25 °С и последующего фильтрования через бумажный фильтр.

Величина рН, определенная по  МУК 4.2.2316-08, является условной величиной, которая соответствует значению рН готовой среды и может незначительно меняться после стерилизации. Пределы значения рН, указанные выше, учитывают отклонения рН после стерилизации среды.

  1. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

Специфическая активность. Питательная среда с СД обеспечивает во всех засеянных пробирках рост тест-штаммов Listeria monocytogenes 766 и Listeria ivanovi при посеве  по 0,1 мл микробной взвеси в 10 мл среды из разведения 10-7 (около 10 м.к.) не позднее 48 ч инкубации при температуре 30 °С в виде помутнения среды, при встряхивании которой наблюдаются муаровые волны.

Ингибирующие свойства. Питательная среда с СД полностью подавляет во всех засеянных пробирках рост тест-штаммов Escherichia coli АТСС 25922, Proteus vulgaris HX 19 222 и Staphylococcus aureusWood-46 при посеве по 0,1 мл микробной взвеси в 10 мл среды из разведения 10-4 (10000 м.к.) через 48 ч инкубации при температуре 30 °С.

 

  1. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Среда ПБЛ Оболенск относится к медицинским изделиям с низким индивидуальным риском и низким риском для общественного здоровья – класс 1.

При анализе исследуемого материала – соблюдение СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV группы патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней».

 


  1. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
  • Термостат, обеспечивающий температуру 30 °С
  • Весы лабораторные 2 класса точности
  • Автоклав
  • Пипетки стеклянные, позволяющие отбирать объемы жидкости 1 и 2 мл
  • Цилиндр стеклянный мерный вместимостью 1000 мл
  • Пробирки
  • Вода дистиллированная
  • Колбы
  • Воронки стеклянные
  1. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

6.1. Объекты исследований в клинической, санитарной и пищевой микробиологии.

6.2. Взятие, посев и хранение исследуемого материала проводят в соответствии с
ГОСТ Р 51921-2002 «Продукты пищевые. Методы выявления и определения бактерий Listeria monocytogenes», МУК 4.2.1122-02 «Организация контроля и методы выявления  бактерий Listeria monocytogenes в пищевых продуктах», «Методическими рекомендациями по лабораторной диагностике листериоза животных и людей» и другими нормативными документами.

 

  1. Проведение АНАЛИЗа

Исследование  проводят в условиях бактериологической лаборатории медицинскими специалистами, имеющие разрешение на работу с микроорганизмами III-IV групп патогенности.

7.1. Приготовление среды ПБЛ.

33,5 г препарата тщательно размешивают в 1 л дистиллированной воды, кипятят в течение 2 мин, фильтруют через ватно-марлевый фильтр и стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин.

7.1.1 Приготовление среды ПБЛ с селективной добавкой.

Содержимое флакона с селективной добавкой растворяют в 5 мл дистиллированной воды, тщательно перемешивают и вносят в стерильную, охлажденную до температуры 50-55 °С среду ПБЛ из расчета 2,2 мл на 1 л среды для приготовления среды предобогащения и 4,4 мл на 1 л среды обогащения.

Готовая среда прозрачная желтого цвета.

Готовую среду можно использовать в течение 7 суток при температуре хранения
2-8 °С.

После каждого вскрытия и проведения необходимых исследований банку со средой плотно закрыть и поместить на дальнейшее хранение при температуре 2-30 ˚С.

7.2. Исследуемый материал засевают соответственно в среду ПБЛ с СД и инкубируют при температуре 30 ° С  не более 48 ч.

 

  1. УЧЕТ И РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

Учет результатов проводят визуально не позднее 48 ч инкубации посевов при температуре 30 ° С. Рост листерий обнаруживается в виде помутнения среды, при встряхивании которой наблюдаются муаровые волны.

Для получения достоверных результатов посевы образцов производить не менее чем в трех повторностях.

  1. УТИЛИЗАЦИЯ

Серии среды ПБЛ, пришедшие в негодность (нарушение целостности упаковки), а также в связи с истекшим сроком годности, утилизируются в соответствии с СанПиН 2.1.7.2790-10 как отходы, принадлежащие к классу «А» – эпидемиологически безопасные отходы, любым способом, предотвращающим повторное использование, например, сжиганием.

Уничтожение среды ПБЛ после проведения биологического контроля осуществляется по СанПиН 2.1.7.2790-10 как медицинские отходы, принадлежащие к классу «Б» с обязательным предварительным обезвреживанием путем автоклавирования в течение 2 ч при температуре (126±1) ˚С.

Обращение с медицинскими отходами следует выполнять согласно схеме, принятой в конкретной организации, осуществляющей медицинскую и (или) фармацевтическую деятельность. Данная схема разрабатывается в соответствии с требованиями вышеуказанных санитарных правил и утверждается руководителем организации.

 

  1. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ ИЗДЕЛИЯ

Среду ПБЛ необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре от 2 до 30 С и относительной влажности не более 60 %. После вскрытия банку со средой хранят до истечения срока годности плотно закрытой, в сухом месте при температуре от 2 до 30 С, избегая попадания влаги.

Среду ПБЛ транспортируют всеми видами крытого транспорта при температуре хранения.

Срок годности набора реагентов: среды ПБЛ – 2 года, СД – не менее срока годности среды. Набор с истекшим сроком годности использованию не подлежит.

Изготовитель гарантирует соответствие среды ПБЛ заявленным в ТУ 9398-107-78095326-2010 требованиям и функциональным характеристикам с начала использования  в течение всего срока годности и при соблюдении условий хранения и транспортирования.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.

По вопросам, касающимся качества набора реагентов для бактериологических исследований «Питательный бульон  для выделения листерий (среда ПБЛ)», получения консультации и поддержки  следует обращаться в адрес предприятия-изготовителя: 142279 Оболенск, Московская обл., Серпуховский р-н, ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии», тел. (4967) 36-00-20, факс 36-01-16.

*) Возможен выпуск набора реагентов в комплектации по требованию заказчика

 

Скачать Инструкцию 

Скачать РУ

Скачать прайс-лист

Среда ПБЛ Оболенск