Cреда Гисса-ГРМ с маннитом Оболенск
ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для бактериологических исследований
«Питательная среда для идентификации энтеробактерий сухая (Cреда Гисса-ГРМ)»
-
НАЗНАЧЕНИЕ Cреда Гисса-ГРМ с маннитом Оболенск
«Среда Гисса-ГРМ» предназначена для бактериологических исследований в санитарной и клинической микробиологии с целью идентификации энтеробактерий по тесту ферментации одного из углеводов (лактозы, глюкозы, сахарозы, мальтозы) или многоатомного спирта (маннита) при диагностике инфекционных заболеваний «in vitro».
-
характеристика набора
«Среда Гисса-ГРМ» представляет собой мелкодисперсный, гигроскопичный, светочувствительный порошок светло-желтого цвета.
Выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г.
2.1. ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ Cреда Гисса-ГРМ с маннитом Оболенск
Совокупность компонентов, входящих в состав набора, обеспечивает питательные потребности для роста и идентификации по биохимическим свойствам отдельных видов микроорганизмов.
2.2. СОСТАВ набора
«Среда Гисса-ГРМ» представляет собой смесь сухих компонентов из расчета, г/л:
| Панкреатический гидролизат рыбной муки (ПГРМ) ….. | 6,0 |
| Натрия хлорид ……………………………………………. | 3,5 |
| Натрия фосфат двузамещенный ………………………… | 0,2 |
| Бромтимоловый синий ………………………………….. | 0,04 |
| Агар микробиологический ……………………………… | 3,5±0,5 |
Концентрация каждого из используемых углеводов: лактозы, глюкозы, сахарозы, мальтозы и многоатомного спирта – маннита составляет – 3,5 г.
-
АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
«Среда Гисса-ГРМ» должна обеспечивать через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С при посеве в пробирки по одной бактериологической петле из разведения, соответствующего 10 единицам по стандартному образцу мутности ОСО 42-28-85 П, соответствующего года выпуска, рост тест-штаммов S. flexneri 1a 8516, E. coli 3912/41 (055:K59), S. dysenteriae I 1362, P. vulgaris HX 19 222, K. pneumoniae 3534/51, S. typhi 65, S. aureus «Виотко» и проявление признаков в соответствии с таблицей.
Биохимические свойства тест-штаммов
| Тест-штаммы | Реакция | ||||
| Глюкоза | Лактоза | Сахароза | Мальтоза | Маннит | |
| S. flexneri 1a 8516 | К | – | – | К | К |
| S. dysenteriae I 1362 | К | – | – | –*) | – |
| S. typhi 65 | К | – | – | К | К |
| E. coli 3912/41 (055:K59) | КГ | КГ | – | КГ | КГ |
| P. vulgaris HX 19 222 | КГ | – | КГ | КГ | – |
| K. pneumoniae 3534/51 | КГ | КГ*) | КГ | КГ | КГ |
| S. aureus «Виотко» | К | К | К | К | К |
Примечание:
К – кислотообразование (изменение цвета среды до желто-зеленого или желтого);
Г – образование газа (появление пузырьков в глубине среды или на ее поверхности);
«-» – отсутствие проявления признаков;
*) – слабая реакция
-
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Взятие, посев инфицированного материала и учет результатов производят в соответствии с “Методическими указаниями по микробиологической диагностике заболеваний, вызванных энтеробактериями” (М., 1984 г) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 г., № 535 “Об унификации микробиологических (бактериологических методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений”.
-
ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
- Термостат обеспечивающий температуру 37±1 °С
- Весы лабораторные 2 класса точности
- Автоклав
- Пробирки стеклянные
- Пипетки стеклянные позволяющие отбирать объемы жидкости 1 и 2 мл
- Цилиндр стеклянный мерный вместимостью 1000 мл
- Чашки Петри стерильные
- Вода дистиллированная
- Колбы
- Воронки стеклянные
-
АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Объекты исследований в санитарной и клинической микробиологии.
-
Проведение АНАЛИЗа
Исследования образцов проводятся по соответствующим Методическим указаниям и ГОСТам.
7.1. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ
Приготовление «Среды Гисса-ГРМ»
Порошок в количестве, указанном на этикетке для приготовления конкретной серии питательной среды, размешивают в 1 л дистиллированной воды, кипятят 3 мин до полного расплавления агара, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, разливают по 4 мл в стерильные пробирки, стерилизуют автоклавированием при температуре 112 °С в течение 20 мин. Готовая среда сине-зеленого цвета.
Готовую среду можно использовать в течение 10 суток при условии хранения ее при температуре 2-8 °С.
-
РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Учет результатов проводят через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С. В случае положительной реакции происходит образование кислоты с изменением цвета среды от сине-зеленого до желто-зеленого или желтого, образование газа сопровождается появлением «пузырьков» в глубине среды или на ее поверхности. Отрицательная реакция характеризуется отсутствием проявления характерных признаков роста в среде.
Для получения достоверных результатов посевы образцов производить не менее, чем в трех повторностях.
-
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
«Среду Гисса-ГРМ» необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре от 2 до 30 С.
Срок годности – 2 года.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.
По вопросам, касающимся качества «Среды Гисса-ГРМ» в течение срока годности следует обращаться в адрес предприятия-изготовителя: 142279 Оболенск, Московская обл., Серпуховский р-н, ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии», тел. (4967) 36-00-20, факс 36-01-16.