FT-агар Оболенск

ИНСТРУКЦИЯ

по применению набора реагентов для бактериологических исследований 

«Питательная среда для культивирования и выделения

туляремийного микроба, сухая» («FT-агар Оболенск»)

 

  1. НАЗНАЧЕНИЕ

«FT-агар Оболенск» предназначен для бактериологических исследований в санитарной и клинической микробиологии с целью выделения возбудителя туляремии из клинического материала и объектов внешней среды при диагностике инфекционных заболеваний «in vitro», а также для культивирования туляремийного микроба для научных работ.

 

  1. характеристика набора

«FT-агар Оболенск» состоит из основы – сухого рыбно-солевого агара (далее – РСА), сухой глюкозо-витаминной добавки (далее – ГВД) и селективной добавки (далее – СД).

Основа расфасована по 250 г в полиэтиленовые банки, глюкозо-витаминная и селективная добавки расфасованы в стеклянные флаконы.

 

2.1. ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ

Совокупность компонентов, входящих в состав набора, обеспечивает питательные потребности для роста туляремийного микроба и ингибиции  отдельных видов микроорганизмов.

2.2. СОСТАВ набора

Состав РСА, г/л:

Сернокислотный гидролизат рыбной муки марки ФКС
по ТУ 9385-069-78095326-2007 ……………………………………………………….
 

17,0

Стимулятор роста гемофильных микроорганизмов
по ТУ 9385-016-78095326-2007 …………………………………………
 

5,0

Дрожжевой экстракт (Yeast Extract, Sanofi Diagnostics Pasteur,
кат. № 64343, Франция) или другой фирмы …………………………….
 

2,3

Магний сернокислый 7-водный по ГОСТ 4523-77 …………………….. 0,5
Натрий сернистокислый по ГОСТ 195-77 ……………………………… 0,7
Цистеин по ФС 42-1048-86 или импортный ………………..………….. 0,5
Агар микробиологический по ГОСТ 17206-96 или импортный ………. 10,0±2,0

 

Состав ГВД, г/л:

Д-глюкоза по ГОСТ 6038-79 или

глюкоза кристаллическая гидратная по ГОСТ 975-88 …………………

 

6,0

Тиамина хлорид по ФС 42-2412-85………………………………………………….. 0,008
Кальция пантотенат по ВФС 42-2530-88…………………………………………. 0,008

 

Состав СД, г/л:

кефзол или цефалексин по ВФС 42-1030-80……………………………………. 0,02
амфотерицин В по ФС 42-1373-89  или

амфоглюкамин по ФС 42-1628-89……………………………………………………

0,01

0,07

 

  1. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

«FT-агар Оболенск»  обеспечивает рост тест-штаммов Francisella tularensis 503, Francisella tularensis A. Cole, Francisella tularensis 120, Francisella tularensis 15 НИИГ при посеве по
0,1 мл взвеси каждого тест-штамма из разведения 10-7 (100 м.к/мл) через 72 ч инкубации при температуре (37±1) °С в виде единичных беловато-серых блестящих колоний диаметром не менее 1,0 мм. Наличие атипичных колоний не допускается.

Показатель ингибиции. «FT-агар» полностью подавляет рост тест-штамов Escherichia coli АТСС 25922 F-51, Proteus vulgaris XI9M 3137,  Staphylococcus aureus  ATCC  25923 F-49, Bacillus cereus АТСС 10702 при посеве  0,1 мл взвеси из разведения
10-4 (1×105 м.к/мл).

 

  1. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Соблюдение «Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения» (Москва, 1981 г.).

 

  1. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
  • Термостат обеспечивающий температуру 37±1 °С
  • Весы лабораторные 2 класса точности
  • Автоклав
  • Пробирки стеклянные
  • Пипетки стеклянные позволяющие отбирать объемы жидкости 1 и 2 мл
  • Цилиндр стеклянный мерный вместимостью 1000 мл
  • Чашки Петри стерильные
  • Вода дистиллированная
  • Колбы
  • Воронки стеклянные

 

  1. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Объекты исследований в санитарной микробиологии, научные исследования.

 

  1. Проведение АНАЛИЗа

Исследования образцов проводятся по соответствующим Методическим указаниям и ГОСТам.

7.1. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ

Приготовление раствора РСА

РСА в количестве, указанном на этикетке, для приготовления конкретной серии питательной среды, растворяют в 970 мл дистиллированной воды и стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин, затем охлаждают до температуры
50-45 °С. Приготовление раствора ГВД

6,02 г ГВД, растворяют в 20 мл дистиллированной воды и стерилизуют при температуре 110 °С в автоклаве в течение 30 мин.

Приготовление раствора СД.

СД растворяют в 10 мл дистиллированной воды.

Приготовление готовой питательной среды

В колбу с охлажденным до температуры 50-45 °С раствором РСА асептически вносят раствор ГВД, перемешивают, затем вносят раствор СД, все тщательно перемешивают и разливают в чашки Петри. (Допускается селективную добавку не вносить при приготовлении среды для культивирования микроба).

Готовую питательную среду можно использовать в течение 5 суток при температуре хранения (8±2) °С.

 

  1. РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ

Учет результатов проводят визуально в соответствии с “Методическими рекомендациями к контролю питательных сред по биологическим показателям” (М.: 1980), при условии вырастания на среде единичных колоний туляремийного микроба, блестящих, прозрачных в проходящем свете, диаметром не менее 1,0 мм. Для изучения морфологии клеток готовят препараты фиксированных клеток, окрашенных по Граму. Бактерии, рассматриваемые под микроскопом, должны представлять собой грамотрицательные, кокковидные клетки. Выросшие культуры тест-штаммов должны агглютинироваться туляремийной сывороткой в разведении не ниже 1/2 ее титра. Реакция агглютинации проводится на стекле.

Для получения достоверных результатов посевы образцов производить не менее, чем в трех повторностях.

 

  1. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА

«FT-агар Оболенск»  необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре от 2 до 30 С.

Срок годности – 2 года.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.

По вопросам, касающимся качества «FT-агара»  в течение срока годности следует обращаться в адрес предприятия-изготовителя: 142279 Оболенск, Московская обл., Серпуховский р-н, ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии», тел. (4967) 36-00-20, факс 36-01-16.

Скачать Инструкцию 

Скачать РУ

Скачать прайс-лист

FT-агар Оболенск